Храм святителя Николая с приделом мученика Петра Авессаломита — один из храмов Новоспасского монастыря.
Он располагается в северо-западном углу братских келий. Из общего келейного корпуса его выделяет небольшой возвышающийся четверик с трехлопастным делением стен, увенчанный одной главкой.
Церковь была построена в 1652 году князем Яковым Черкасским при монастырской больнице.
В подвале Никольской церкви находились застенки, куда сажали присылаемых в монастырь преступников. Там содержался, например, преподобный Дионисий, бывший настоятель Троице-Сергиевой Лавры. Он был заточен в Новоспасский монастырь по ложному обвинению в ереси и был подвергаем пыткам в течение 6 недель.
При советской власти Никольский храм не закрывался дольше других: богослужения в нем продолжались до 1926 года, в него был отдельный вход с улицы. В этот период была создана полулегальная община под названием «Братство во имя Преображения Господня». В 30-е годы здесь находился склад конфискованной мебели и картофелехранилище.